mengisolasi Pathogenicity Beauveria bassiana terhadap Leptinotarsa decemlineata [Coleoptera: Chrysomelidae], Myzus persicae [Homoptera: Aphididae] dan predator mereka Coleomegilla maculata lengi [Coleoptera: kepik].

PENDAHULUAN

Entomopathogenic jamur, Beauveria bassiana Vuillemin (Balsamo) adalah agen kontrol menjanjikan terhadap banyak serangga hama (McCoy 1990). B. bassiana terjadi secara alami pada populasi kumbang kentang Colorado (CPB), Leptinotarsa decemlineata say [Coleoptera: Chrysomelidae], secara ekonomi hama serangga kentang paling penting di Amerika Utara (Radcliffe et al 1991). Beberapa studi telah menunjukkan potensi tinggi ini jamur pengendalian CPB dengan foliar atau aplikasi ke tanah (Anderson et al. 1988; Terwelu dan Andreadis 1983; Watt dan LeBrun 1984). Hama serangga yang kedua dalam tanaman kentang sistem adalah green peach aphid (GPA), Myzus persicae (Sulzer) [Homoptera: Aphididae] (Boiteau et al. 1995). Jenis B. bassiana juga ditemukan untuk menjadi patogen untuk beberapa spesies kutu daun seperti kutu daun sereal (Feng dan Johnson 1990; Feng et al. 1990; Wang dan Knudsen 1993) dan hop aphids (Dorschner et al 1991). spotted ladybird beetle (SLB), Coleomegilla maculata/engr/Timberlake [Coleoptera: kepik], polyphagous predator, adalah agen pengendalian biologis penting lain CPB dan GPA (Giroux et al. 1996; Groden et al. 1990; Hazzard dan Ferro 1991).

Dalam program pengendalian biologis dan pengelolaan hama terpadu, penting untuk mengetahui tidak hanya efek dari agen biologi pada serangga hama tetapi juga mungkin interaksi antara agen kendali yang berbeda. B. bassiana dianggap sebagai patogen dengan host yang luas jangkauan, menginfeksi perintah serangga yang berbeda (Goettel et al. 1990). Laboratorium dan lapangan percobaan telah menunjukkan kerentanan yang berbeda dari C. maculata terhadap berbeda isolat B. bassiana (Goettel et ai. 1990; Contreras et al. 1988; Pingel dan Lewis 1996; Todorova et al. 1994). Tujuan dari studi ini adalah untuk menguji di laboratorium 10 efek  patogen terisolasi dari B. bassiana menuju L. decemlineata pada Myzus persicae dan mereka predator C. maculata lengi.

BAHAN DAN METODE

mengisolasi jamur

Sepuluh isolat l. bassiana yang digunakan dalam studi ini. Host dan negara asal mereka asli didaftar di dalam tabel 1. Isolat jamur dipilih karena mereka menyebabkan lebih dari 61% kematian di antara CPB dewasa  di 107 conidia ml^-1 konsentrasi dari antara 60 mengisolasi diuji di awal bioassays (Todorova 1998). Terisolasi yang disimpan di - 80⁰C di Sabouraud dekstrosa agar (SDA; Difco).

memperbesar serangga

Orang dewasa CPB dan GPA dikumpulkan dari lapangan kentang di L'Epiphanie, Quebec, Kanada (lat. 45⁰50' N, long. 73⁰25' W). Serangga yang dipelihara dalam kandang dengan tanaman kentang ('Kennebec' cv.) di bawah kondisi yang terkendali (23⁰C, 40% RH, 1 6 L: 8 D). C. maculata lengiwere dikumpulkan, dari hibernasi situs di Saint-Hyacinthe, Quebec, Kanada (lat. 45⁰39' N, long. 72⁰56' W). Mereka yang dibesarkan di 24⁰C, RH 60% dan photoperiod 16 L: 8 D diet bunga serbuk sari dan diet liverbased buatan (Coderre, tidak diterbitkan pada data).

Bioassay

Conidia dari 20 hari-tua budidaya sporulating, tumbuh di SDA, dipanen dengan lembut menggunakan penguas steril dan ditambahkan ke saline solution (0,85% NaCl; 0. 1% Triton X-100). Konsentrasi disesuaikan untuk 1.x 107 conidia ml^-1 didasarkan pada awal bioassays. Kelompok 10 CPB, 20 GPA atau 10 SLB diinokulasi dengan pencelupan untuk 5 s 10 ml conidial suspensi dari setiap isolat seperti yang dijelaskan oleh Butt et al. (1994). Kontrol serangga diperlakukan seperti di atas, tetapi tanpa jamur. Setiap assay terdiri dari tiga ulangan.

            Setelah inokulasi, setiap kelompok dari 10 CPB dewasa dipindahkan ke 150 mm x 10 mm piring Petri dilapisi dengan kertas filter Whatman no. 1 yang lembab dan disediakan dengan daun-daun tanaman kentang segar.

            Daun diganti setiap hari. Dua puluh lima gram serbuk sari bunga per 150 mm x 10 mm Petri dish digunakan sebagai makanan untuk setiap kelompok diperlakukan SLB orang dewasa. Setiap kelompok orang dewasa GPA ditempatkan pada daun kentang di piring Petri 50 mm x 10 mm. semua serangga  yang diperlakukan diinkubasi di 24⁰C dan photoperiod L 16: 8 D. Kematian tercatat harian untuk 8 d.

            Hasilnya adalah dengan arcsin-transformed dan analysed menggunakan ANOVA satu arah diikuti oleh Fisher PLSD tes. Statistik tes dilakukan menggunakan SuperANOVA^tm 1.1 untuk Macintosh (sempoa konsep Inc 1989).

HASIL

Pathogenecity isolat B . bassiana

Efek B. bassiana pada kematian CPB berbeda secara signifikan antara isolat (ANOVA; F = 41.3; DF = 10, 28; P = 0,0001) (Fig. 1a). Semua 10 isolat diuji kematiannya sangat berbeda dari kelompok kontrol disebabkan post-treatment 8 d (Fisher\'s dilindungi LSD tes, P = 0,0001). Eksternal tanda-tanda infeksi yang pertama kali terlihat pada 4 d setelah infeksi dan dicirikan oleh pertumbuhan mycelial atastubuh serangga yang mati. Kematian tertinggi oleh setalah perlakuan 8 d yang masing-masing 100, 93,3, 90 dan 86.7% untuk isolat 353, 46, 210087 dan 252. Pathogenicity B. bassiana untuk GPA berbeda secara signifikan antar isolat (ANOVA; F = 5.18; DF = 10,25; P = 0.0004) (Fig. 1b). Kematian yang disebabkan oleh infeksi jamur pertama diamati setalah perlakuan di 2 d untuk semua isolat jamur kecuali untuk isolasi 2990. Namun, untuk periode ini, hanya isolat 28 dan 252 menyebabkan kematian yang sangat berbeda dari kontrol (LSD, P & lt; 0.045). Selama 2 hari berikutnya, kematian karena untuk isolasi 353 meningkat tajam hingga 87,8%. Isolasi 353 dan 252 adalah satu-satunya yang menyebabkan kematian yang sangat berbeda dari kontrol oleh 4 dan 6 d setelah penginfeksian periode (LSD, P = 0.001). Oleh 8 d setelah infeksi, isolat 49 dan 353 menyebabkan kematian 100% GPA, sangat berbeda dari kontrol (LSD, P = 0,0001). Isolat 252, 20, 210087, 46 dan 28 menyebabkan kematian yang sangat berbeda dari kontrol, masing-masing 98.8, 92.7, 89, 85.4 dan 75.6% (LSD, P & lt; 0.015). C. maculata lengi dewasa kurang rentan terhadap B. bassiana isolat diuji dari CPB dan GPA (Fig. 1 c). Empat hari setelah perlakuan, hanya isolasi 353 menyebabkan kematian yang berbeda dari kontrol (20%) (LSD, P = 0,01). Setelah periode ini, efek B. bassiana terhadap SLB berbeda secara signifikan antara isolat (ANOVA; di 6 hari setelah perlakuan: F = 5,95, df = 10, 28; P = 0,0001; di 8 d setalah perlakuan: F = 9.33; DF = 10, 28; P = 0,0001). di posisi 8 d perlakuan , isolasi 353 penyebab kematian tertinggi ( 76 . 7 % ). Kematian yang disebabkan oleh isolat 252, 2990, 28, 226, 46 dan 20 adalah antara 20 dan 70%, secara signifikan lebih tinggi daripada kontrol (LSD, P & lt; 0,008). Isolat 233, 210087 dan 49 disebabkan kematian SLB dewasa tidak berbeda dari kontrol (LSD, P & gt; 0.052).

Virulensi terpilih B. bassiana yang di isolasi

Isolasi 49,233 dan 210087 telah diseleksi atas dasar bahwa mereka adalah satu-satunya yang menyebabkan kematian SLB tidak secara signifikan berbeda dari kontrol oleh 8 d posting infeksi (Fig. 1 c). Kumulatif jumlah kematian pada plot terhadap hari setalah infeksi (Fig. 2). Lereng kurva masing-masing memberikan informasi tambahan pada isolasi virulensi.

            Hanya isolasi 49 disebabkan kematian pada CPB secara signifikan berbeda dari kontrol di 2 dan 4 hari posting infeksi (LSD, P = 0,03 dan P = 0,02) (Fig. 2a). namun , setelah periode ini , kematian itu karena untuk tiga isolasi meningkat tajam untuk mencapai 56 . 7 , 66 . 7 dan 90 % untuk isolasi 49 , dan 21007 233 , masing masing , oleh 8 d posting infeksi. Pada 6 hari posting infeksi, kematian GPA yang disebabkan oleh semua ketiga isolat yang signifikan tidak berbeda dari kontrol (LSD, P & gt; 0.18) (Fig. 2b). Namun, isolasi 233 menyebabkan kematian 59.7% hanya 4 hari. Kemudian, isolat ini berhenti aktivitasnya. Mengisolasi 49 dan 210087 menyebabkan100  dan kematian 89%, masing-masing, oleh 8 d posting infeksi. Untuk SLB, kematian tertinggi oleh 8 d posting treatement adalah 13,3% untuk isolasi 49, tetapi tidak secara signifikan berbeda dari kontrol (LSD, P = 0.052) (Fig. 2 c).

DISKUSI

            Beberapa studi telah menunjukkan bahwa host serangga yang sama dapat tahan strain B. bassiana tertentu dan sangat sensitif terhadap yang lain (pantat et al. 1994; Fargues 1972; Todorova et al. 1994, 1996). Strain tertentu mungkin menunjukkan tidak pathogenicity untuk satu host dan menyebabkan kematian yang tinggi pada serangga-serangga lainnya dalam urutan yang sama (Fargues 1976; Todorova et al. 1994).

Perbedaan yang signifikan ditemukan di kematian antara isolat B. bassiana 10 yang diuji pada L. decemlineata, M. persicae, dan C. maculata lengi (Fig. 1). Isolasi 353, 252, 2990, 46, 28 dan 20 menyebabkan kematian yang tinggi di antara tiga spesies serangga. namun , isolates yang menunjukkan perbedaan derajat derajat specificity.

Isolat 49 dan 210087 muncul yang paling menjanjikan untuk pengendalian biologis pemanfaatan karena mereka sangat virulen oleh 8 d posting infeksi dua hama namun tidak untuk predator mereka. Mortalitas karena isolasi 49 adalah 56,7%, 100% dan 13,3% karena , masing-masing CPB, GPA dan SLB. Isolasi 210087 menunjukkan kematian 100% terhadap CPB, 89% terhadap GPA dan hanya 10% pada SLB.

yang telah ditunjukkan isolasikan 233 juga potensiil yang menarik dilakukan di masa depan. Meskipun isolat ini menyebabkan kematian di GPA tidak secara signifikan berbeda dari kontrol, tampaknya bertindak lebih cepat daripada mengisolasi 49 dan 210087. Meningkatkan konsentrasi yang lebih tinggi daripada 107 conidia ml^-1 mungkin memberikan kematian yang sangat tinggi spesies hama dalam waktu yang lebih singkat daripada dua strain lain.

Patogenesis jamur adalah proses yang kompleks dan tergantung pada atribut, patogen dan host.  Kutikula tampaknya mempengaruhi semua tahapan proses infeksi: adhesi, perkecambahan dan appressorium diferensiasi (pantat 1990). Dalam percobaan kami, kutu daun mati lebih cepat daripada kumbang, mungkin karena tubuh mereka lembut berpose penghalang lemah infeksi dari kutikula keras, kumbang sclerotinized (pantat et al. 1995).

Dalam program pengelolaan hama terpadu, penting untuk menggunakan agen biologi yang kompatibel. C. maculata lengi tempat microhabitats teduh lembab (Coderre dan Tourneur 1986; Ewert dan Chiang 1966). Kondisi ini meningkatkan kemungkinan kontak dengan B. bassiana, dibandingkan dengan lainnya coccinellids (Pingel dan Lewis 1996) dan oleh karena itu menyarankan pendekatan yang lebih berhati-hati dalam pemilihan isolat B. bassiana. penelitian sekarang mengindikasikan bahwa isolat B. bassiana 49, 233 dan 210087 kompatibel dengan C. maculata lengi dan menyajikan potensi yang menarik untuk pengendalian L. decemlineata dan M. persicae. Studi lanjut namun diperlukan untuk menentukan faktor-faktor lingkungan seperti suhu, kelembaban, dll, yang mempengaruhi infeksi dan efek dari B. bassiana isolat CPB, GPA dan SLB di alam.

REFERENCES

Abacus Concepts Inc. 1989. SuperANOVA user's guide. Brain-Power Inc. Calabasas, California. 58 pp.

Anderson, T.E., D.W. Roberts, and R.S. Soper. 1988. Use of Beauveria bassiana for suppression of Colorado potato beetle population in New York state (Coleoptera : Chrysomelidae). Environ. Entomol. 17 : 140-145.

Boiteau, G., R.-M. Duchesne, and D. Ferro. 1995. Use and significance of traditional and alternative insect control technologies for potato protection in a sustainable approach. Pages 169-188 in R.-M. Duchesne and G. Boiteau (eds.), Lutte aux insectes nuisibles de la pomme de terre, Actes du Symposium. Ministère de l'Agriculture, des Pêcheries et de l'Alimentation du Québec (Québec).

Butt, T. M. 1990. Fungal infection processes

- a mini-review. Pages 121-124 in Vth International Colloquium on Invertebrate Pathology, SIP, Adélaïde.

Butt, T.M., L Ibrahim, B.V. Bail, and S.J. Clark. 1994. Pathogenicity of the entomogenous fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana against crucifer

pests and the honey bee. Biocontrol Sci. Technol. 4 : 207-214.

Butt, T.M., L Ibrahim, S.J. Clark, and A. Beckett. 1995. The germination behavior

of Metarhizium anisopliae on the surface of aphid and flea beetle cuticles. Mycol. Res. 99 : 945-950.

Coderre, D., and J.C. Tourneur. 1986. Vertical stratification of aphids and aphidophagous insects in maize. Pages 111-117 in I. Hodek (éd.), Ecology of Aphidophaga II. Academia, Praha.

Dorschner, K.W., M.-G. Feng, and C.R. Baird. 1991. Virulence of an aphid-derived isolate of Beauveria bassiana (Fungi : Hyphomycetes) to the Hop aphid, Phorodon humuli (Homoptera : Aphididae). Environ. Entomol. 20 : 690-693.

Ewert, M.A., and H.C. Chiang. 1966. Dispersai of three species of coccinellids in corn fields. Can. Entomol. 98 : 999-1001.

argues, J. 1972. Étude des conditions d'infection des larves de doryphore Leptinotarsa decemlineata Say par Beauveria

bassiana (Bals.) Vuill. (Fungi imperfecti). Entomophaga 17 : 319- 337.

Fargues, J. 1976. Spécificité des champignons pathogènes imparfaits (Hyphomycetes) pour les larves de Coléoptères

(Scarabaeidae et Chrysomelidae). Entomophaga 21 : 314-323.

Feng, M.-G., and J.B.Johnson. 1990. Relative virulence of six isolâtes of Beauveria bassiana on Diuraphisnoxia (Homoptera : Aphididae). Environ. Entomol. 19 : 785-790.

Feng, M.-G., J.B. Johnson, and L.P. Kish. 1990. Virulence of Verticillium lecaniiand an aphid-derived isolate of Beauveria

bassiana (Fungi : Hyphomycetes) for six species of cereal-infesting aphids (Homoptera : Aphididae). Environ. Entomol. 19 : 815-820.

Giroux, S., R.-M. Duchesne, and D. Coderre. 1996. Biological control of Colorado potato beetles using inundative releases of

Coleomegilla maculata lengi. Pages 125- 143 in S. Giroux, Évaluation du potential de la coccinelle maculée comme agent de lutte biologique contre le doryphore de la pomme de terre. Thèse du Doctorat en Sciences de l'environnement, Université du Québec à Montréal (Québec), Canada.

Goettel, M.S, T.J. Poprawski, J.D. Vandenberg, Z. Li, and D.W. Roberts. 1990. Safety to nontarget invertebrates of fungal biocontrol agents. Pages 210-231 in M. Laird, L.A. Lacey and E.W. Davidson (eds.), Safety of Microbial Insecticides. CRC Press, Boca Raton, FL.

Groden, E., F.A. Drummond, R.A. Casagrande, and D.L. Haynes. 1990. Coleomegilla maculata (Coleoptera : Coccinellidae) : Its prédation upon the Colorado potato beetle (Coleoptera : Chrysomelidae) and its incidence in potatoes and surrounding crops. J. Econ. Entomol. 83 : 1306-1315.

Hare, J.D., and T.G. Andreadis. 1983. Variation in the susceptibility of Leptinotarsa decemlineata (Coleoptera : Chrysomelidae)

when reared on différent host plants to the fungal pathogen, Beauveria bassiana in the field and laboratory. Environ. Entomol. 12 : 1892-1897.

Hazzard, R.V., and D.N. Ferro. 1991. Feeding responses of adult Coleomegila maculate (Coleoptera : Coccinellidae) to eggs of Colorado potato beetle (Coleoptera : Chrysomelidae) and green peach aphids (Homoptera : Aphididae). Environ. Entomol. 20 : 644-651.

RINGKASAN

Sepuluh isolat Beauveria bassianafrom sumber yang berbeda dan geografis situs dievaluasi di bawah kondisi laboratorium pada konsentrasi 107 conidia ml^-1 untuk pathogenicity mereka terhadap dua serangga hama, kumbang kentang Colorado [Leptinotarsa decemlineata) dan {Myzus persicae) aphid Persik hijau, dan predator mereka, spotted ladybird beetle{Coleomegilla maculata lengi). Enam isolat adalah sangat virulen untuk semua tiga spesies serangga. Empat orang lain menunjukkan derajat yang berbeda kekhususan. Isolat 49, 233 dan 210087 adalah yang paling menarik untuk perkembangan potensi kontrol biologis agen karena mereka sangat virulen untuk serangga hama dua dan menyebabkan kematian yang rendah di coccinellid.

KELEBIHAN JURNAL INI :

-          Jurnal ini menguji efek patogenity Beuveria bassiana terhadap dua serangga hama, kumbang kentang Colorado [Leptinotarsa decemlineata) dan (Myzus persicae) aphid Persik hijau, dan predator mereka, spotted ladybird beetle{Coleomegilla maculata lengi). Sehingga didapat diketahui straint Beauveria bassiana yang efektif digunakan untuk mengendalikan dua serangga hama, kumbang kentang Colorado [Leptinotarsa decemlineata) dan (Myzus persicae) aphid Persik hijau tanpa memberikan efek kepada predator mereka spotted ladybird beetle{Coleomegilla maculata lengi).

KELEMAHAN JURNAL INI :

-          Percobaan dilakukan di pada lingkungan yang terkontrol yaitu skala laboratoruim, sehingga perlu juga di teliti efektifitas pengendalian dengan menggunakan Beauveria bassiana terhadap dua serangga hama, kumbang kentang Colorado [Leptinotarsa decemlineata) dan (Myzus persicae) aphid Persik hijau di lapangan dan bagaimana cara pengaplikasiaannya.